LC-MS/MS直接进样法检测人尿中麻黄碱类药物的基质干扰

摘要

世界反兴奋剂机构将麻黄碱类刺激剂列入禁用物质清单，并做如下限量规定:去甲伪麻黄碱5mg/L;麻黄碱和甲基麻黄碱10 mg/L;伪麻黄碱150 mg/L。研究发现，无须对尿样进行前处理，将尿样稀释10或100倍后直接进样，可大大缩短检测时间，并降低检测成本。但该方法的不足之处是尿样的基质干扰使得检测误差在10%左右。为进一步提高检测的准确性，使之更适合常规检测的需要，拟对尿样的基质干扰进行研究。rn 对于麻黄碱、去甲伪麻黄碱或甲基麻黄碱，因其尿样浓度被稀释10倍，待检样品中的尿量相对较大(50μL在500μL定容溶液中)，基质干扰比较明显。通过比对发现，在工作曲线溶液中加入50μL儿童空白尿时，定量检测的结果较好;而当加入相同量的去离子水或其他成人空白尿时，检测结果的误差较大。对于伪麻黄碱，其尿基质在定容溶液中只占1%(相当于5μL尿在500μL定容溶液中)，因此，基质的干扰要小很多，使用去离子水或儿童空白尿配制工作曲线溶液时，均得到满意的定量结果。对上述尿基质干扰的原理还不是很清楚，也许由于成人尿中的内源性物质比较多，对样品的离子化产生抑制或增强作用，目前还在做进一步研究。该LC-MS/MS联用技术经实验验证，获得满意的灵敏度、准确度和精密度，其定量的绝对误差小于5%。该方法可以同时定量分析尿样中的多种麻黄碱类药物。rn 该方法的最大特点是:尿样经适当稀释后无须过滤即可直接进样，最大限度地减少了样品的前处理过程，因此大大降低了前处理过程中引入误差的可能，缩短了检测周期，降低了检测成本。目前该方法己用于实验室的麻黄碱类药物常规定量检测和获WADA认可实验室之间的结果比对。