外环境01/0139群霍乱弧菌毒素相关基因分型研究

摘要

目的：应用多重聚合酶链反应(PCR)检测方法了解外环境霍乱弧菌8种毒素相关基因的携带情况及基因分型情况。方法：针对霍乱弧菌CTX基因元件的霍乱肠毒素基因(ctxA)，辅助霍乱肠毒素基因(ace)，小带联结毒素基因(zot)，TCP基因元件的毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)及调控基因(tcpI)，以及溶血素基因(HlyA)，外膜蛋白基因(ompU)，ToxR调控蛋白基因(toxR)设计引物，应用多重PCR方法检测2008-2009年分离的90株01/0139群霍乱弧菌(外环境水体69株，水产品16株，病例5株)进行毒素相关基因检测，并根据检测结果进行毒素相关基因分型。结果：所有被检菌株均含有hlyA和toxR基因。病例菌株以产毒株为主，5株病例菌株中有3株8种毒素基因全部阳性，2株非产毒小川型菌株基因型为hlyA+toxR+ompU0+zot+tcpA+tcpI+型和hlyA+toxR+tcpA+型。外环境菌株均为非产毒株，外环境水体菌株毒素相关基因型别中稻叶型菌株34.15％(14/41)为hlyA+toxR+ompU+ace+zot+tcpI+型，小川型(66.67％，12/18)和0139群(70％，7/10)以hlyA+toxR+型为主。外环境水产品霍乱弧菌毒素相关基因分型，稻叶型菌株75.00％(3/4)为tlyA+toxR+ ompU+tcpI+型，小川型菌株可见各种基因型别分布，无优势基因型别。结论：外环境霍乱弧菌毒素相关基因型别多样，了解外环境霍乱弧菌的毒素相关基因分布状况对于理解霍乱弧菌的毒力作用机制和探索霍乱弧菌基因特征以及进行人群健康危险评估具有非常重要的意义。