异甘草素逆转肺腺癌细胞多药耐药及其机制的研究

摘要

目的:多药耐药(multi drug resistance,MDR)是造成临床肿瘤化疗中断和治疗失败的主要原因,因此,近年来许多学者致力于MDR及其逆转的研究.现已发现,对P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达和功能的抑制,可以恢复MDR细胞对化疗药物的敏感性,逆转肿瘤细胞多药耐药性.异甘草素(isoliquiritigenin,ISL)是甘草中分离的一种黄酮类化合物,现已发现其具有松弛血管、抗过敏和抗肿瘤等多种药理作用,但对肺癌耐药的影响尚未见报道.本文探讨异甘草素对肺腺癌耐药细胞株(A549/R) MDR的影响及其调节机制,为寻求高效低毒的MDR逆转剂,提高非小细胞肺癌临床治疗效果提供理论和实验依据.rn 方法:①采用四氮唑盐(MTT)法检测异甘草素的细胞毒性及其对人肺腺癌耐药细胞株(A549/R)阿霉素(Adriamycin,ADM)药敏性的影响;②荧光分光光度计法测定细胞内ADM浓度;③半定量逆转录聚合酶链反应(semiquantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测mdr1 mRNA表达;④Western blot检测P-gp蛋白表达.rn 结果:①A549/R和A549的IC50分别为ADM 0.548μmol/L和0.050μnol/L,耐药倍数约为11倍;异甘草素在非细胞毒剂量下浓度(1-5 μmol/L)依赖性降低A549/R的IC50值,其逆转倍数为2.43-42.15倍.异甘草素对A549也有增效作用;②A549细胞内ADM积累是A549/R细胞3.0倍,表明A549/R细胞具有典型耐药细胞特征,异甘草素1,2.5和5.0 μmol/L处理可使A549/R细胞ADM浓度分别增加2.6,4.8和9.7倍,可使A549细胞ADM浓度有所增加,但差别不显著(＜1.3倍);③与A549相比,肺癌耐药细胞A549/R中可检测到mdr1 mRNA及相应蛋白P-gp的过表达.不同浓度的异甘草素可浓度依赖性下调mdr1 mRNA及P-gp表达,但其表达水平仍高于敏感株A549.rn 结论:异甘草素可逆转A549/R细胞的MDR,其机制主要与抑制P-gp过表达,增加细胞内的ADM积累有关.